以下是提高島津液相色譜柱使用壽命的方法：
一、使用前的準(zhǔn)備與活化
1.仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)并選擇合適色譜柱：在使用前認(rèn)真研讀色譜柱的說(shuō)明書(shū)，充分了解其種類(lèi)、特性及適用范圍。依據(jù)所分析樣品的極性大小、化合物的種類(lèi)數(shù)量、結(jié)構(gòu)特征等因素，精準(zhǔn)選用與之匹配的色譜柱。例如分析極性較大的多糖類(lèi)成分時(shí)，應(yīng)采用親水性的反相填料。對(duì)于使用的色譜柱，按照廠家的出廠說(shuō)明進(jìn)行低流速的沖洗活化操作，此舉可增強(qiáng)色譜填料的共價(jià)鍵鍵合力，進(jìn)而提高柱效并延長(zhǎng)壽命。
2.做好樣品預(yù)處理
制樣溶劑選擇：制樣溶劑需綜合考慮樣品的溶解性、與流動(dòng)相的相溶性以及色譜填料的適用性。應(yīng)挑選對(duì)樣品有較大溶解性且與流動(dòng)相混溶的溶劑，同時(shí)洗脫強(qiáng)度最好低于流動(dòng)相或梯度洗脫中的起始流動(dòng)相，以免影響樣品分離。許多手性色譜柱禁止使用DMSO、四氫呋喃、氯仿等溶劑，因?yàn)檫@些溶劑會(huì)破壞固定相的結(jié)構(gòu)，縮短色譜柱使用壽命。此外，制樣溶劑還需與色譜系統(tǒng)其他部件如高壓泵、進(jìn)樣器等相適配。
制樣溶劑過(guò)濾：在進(jìn)樣前，使用0.22μm的微孔濾膜對(duì)樣品溶液進(jìn)行過(guò)濾，除去不溶性微粒，防止堵塞柱頭濾片及柱內(nèi)填充床。若條件允許，最好采用與色譜柱同種填料的固相萃取柱過(guò)濾進(jìn)樣溶液，這樣可以減少在色譜柱上死吸附的物質(zhì)或易堵塞的大分子樣品。比如生物樣品中的小極性的油脂類(lèi)物質(zhì)易于沉淀死吸附在C18反相色譜柱中，導(dǎo)致柱效降低、柱壓升高，而采用SPE柱過(guò)濾后，可有效減少此類(lèi)情況發(fā)生，保護(hù)色譜柱不被污染。
控制溶液濃度和進(jìn)樣量：避免過(guò)高的樣品負(fù)荷，防止樣品在柱子表面大量殘留，從而延長(zhǎng)柱子的使用壽命。強(qiáng)酸、強(qiáng)堿性物質(zhì)和蛋白質(zhì)類(lèi)生物大分子等能與固定相填料作用，或生成不可逆吸附層，改變填料表面特征，使色譜柱性能發(fā)生變化，最終導(dǎo)致分離失效，因此要特別注意這類(lèi)物質(zhì)的進(jìn)樣量。
1.優(yōu)化流動(dòng)相選擇與處理
流動(dòng)相兼容性：所選用的流動(dòng)相應(yīng)與色譜柱、待分析樣品相兼容，即樣品、樣品溶液和流動(dòng)相互溶，且不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。色譜分析應(yīng)優(yōu)先選擇色譜級(jí)的流動(dòng)相，因?yàn)榉治黾兊娜軇┖形⒘侩s質(zhì)，大量使用后會(huì)引起色譜柱性能變化。建議使用色譜純級(jí)或者更高純度的試劑，以降低溶劑中雜質(zhì)帶來(lái)的損傷。
流動(dòng)相過(guò)濾與脫氣：使用色譜純?cè)噭┡渲屏鲃?dòng)相后，在使用前需經(jīng)0.45μm或者更小孔徑的濾膜過(guò)濾和超聲脫氣處理，減少灰塵、微生物等雜質(zhì)堵塞色譜柱，尤其是水溶性流動(dòng)相易引起微生物生長(zhǎng)而造成色譜柱阻塞。流動(dòng)相最好是現(xiàn)配現(xiàn)用，放置時(shí)間最好不要超過(guò)2天。
控制流動(dòng)相pH值和緩沖鹽使用：極*pH的流動(dòng)相會(huì)破壞填料內(nèi)的共價(jià)鍵，“溶解”硅膠，使固定相流失，從而降低柱效，縮短使用壽命。以硅膠作基質(zhì)的固定相一般要求pH在2.5~7范圍內(nèi)使用。長(zhǎng)期在pH>7或pH<2的環(huán)境中，硅膠會(huì)逐漸溶解或者表面鍵合的官能團(tuán)會(huì)逐漸流失。如果必須使用高或低pH的流動(dòng)相，應(yīng)選用相適應(yīng)的色譜填料。
合理控制流速：不同粒徑的色譜柱有對(duì)應(yīng)的推薦流速范圍。
2.正確操作儀器：每次開(kāi)機(jī)使用分析儀器時(shí)，避免泵啟動(dòng)過(guò)快導(dǎo)致流速和柱壓瞬間升高，使柱床受到?jīng)_擊而引起紊亂，產(chǎn)生空隙。在操作實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，應(yīng)當(dāng)將流速和柱壓逐漸增加，給予色譜柱一個(gè)緩沖適應(yīng)的過(guò)程。
3.使用保護(hù)柱：“保護(hù)柱”是與所使用液相色譜柱相同填料的短型色譜柱，它可以有效地阻攔容易損壞色譜柱的大分子和不溶性顆粒，過(guò)濾易沉著色譜柱上產(chǎn)生死吸附的物質(zhì)，從而延長(zhǎng)主分析柱的壽命。
4.控制柱溫：不同類(lèi)型的色譜柱耐受的溫度各有差別。通常色譜柱溫維持在10～40℃之間，能夠充分、優(yōu)地發(fā)揮色譜柱的性能。超出色譜柱溫度范圍，尤其高于柱溫范圍，會(huì)增加對(duì)流動(dòng)相中化學(xué)物質(zhì)的吸附，引起色譜柱固定相結(jié)構(gòu)的改變；此外，還可能引起柱床塌陷，改變峰形，降低柱效，產(chǎn)生不可逆性的損傷。
